PCR儀的使用方法和注意事項
發(fā)布時間：2013-09-24 閱讀：608次
PCR儀，也稱DNA熱循環(huán)儀、基因擴增儀，它是使一對寡核苷酸引物結(jié)合到正負DNA鏈上的靶序列兩側(cè)，從而酶促合成拷貝數(shù)為百萬倍的靶序列DNA片段，它的每一循環(huán)包括在三種不同溫度進行DNA變性、引物復性、dna聚合酶催化的延伸反應的三個過程。
PCR儀主要應用于基礎(chǔ)研究和應用研究等許多領(lǐng)域，如基因分析、序列分析、進化分析、臨床診斷、法醫(yī)學等等。隨著分子生物學的不斷發(fā)展，pcr擴增技術(shù)也得到普及推廣應用，因此了解PCR儀的性能，熟練掌握儀器的正確使用方法及使用過程中的注意事項，將是十分必要的。
現(xiàn)介紹PCR 擴增儀(Tl thermocycler)的使用方法和注意事項。
1. 使用方法
(1)接通電源開關(guān)，儀器進入準備狀態(tài);在顯示屏上記錄了當前儀器的溫度和蓋子(Lid)的溫度。若儀器正在運行時，須按“ B ”鍵(start/stop)，才能退出運行并返回準備狀態(tài)。
(2)編寫程序段。在準備狀態(tài)下按“ C ”鍵(programs)進入編程狀態(tài)，選定一程序號，然后按“enter”鍵，進入下一程序;按 “A”(list)鍵后，選一文件號(empty program);再按“enter”鍵，進入下一程序;按“ABC”鍵，進入下一程序，用上下左右鍵號選擇一個字母(A、B、C、D、…)，然后按“enter”鍵，進入下一程序;按“name ok”鍵，完成文件命名。
(3)設(shè)定蓋子的溫度。“lid temp： ℃”，蓋子的溫度一般比變性溫度要高10℃，例如變性溫度是95℃，那么蓋子的溫度就要設(shè)定為105℃。待蓋子預熱后按“enter”鍵，進入下一程序。
(4)設(shè)定變性溫度、變性時間、延伸溫度、延伸時間、退火溫度、退火時間及循環(huán)總數(shù)等參數(shù)。從步依次按“enter”鍵進入，用四個移位鍵移動設(shè)定位置。先設(shè)定溫度，后設(shè)定時間，全部參數(shù)設(shè)置完后，按“pgm ok”鍵，所設(shè)定的程序自動被保存。
(5)運行程序。檢查設(shè)定是否正確， 按“start”鍵，選擇設(shè)定好的程序，開始運行。顯示屏上可觀察到系統(tǒng)運行的情況，按“Stop”可停止運行。
