梯度PCR儀標準曲線總不成線性關系這是怎么回事？
發布時間：2014-03-21 閱讀：948次
隨著基因組高通量研究的需求的提高，各品牌都推出了多槽式高通量PCR儀，各有特長：MJ有一種一拖四，就是1個主機帶4個擴增槽，每個槽可以控溫，一次可以作96x4個樣品的PCR，不過一旦出現問題4個都不能用了。這一技術保證了在梯度模式和普通模式之間可以進行可靠的信息傳遞，不會因為溫度特性不同而導致產量和特異性的變化。
如果你做的等比稀釋，那一般都是加樣誤差導致的。你的移液器需要校正，不成線性，說明是曲線尾的濃度偏離較大。
1.梯度稀釋問題
主要引起原因：a加樣手法b試用低附著進口耗材。
2.PCR管用高質量PCR管，管身不能做標記。
3.RealtimePCR儀器若為頂部激發檢測請使用透明光學管蓋。
4.PCR管不要放置在溫塊的邊緣位置。
5.做梯度前，把色譜柱用純的有機溶劑沖洗一下或是用新的色譜柱，防止柱內殘留物引起基線的漂移。
6.試劑純度都是正規的色譜純試劑，如何純度不夠，在梯度時，也會出現基線的漂移。
7.控制好室溫或柱溫，防止有較在的溫度波動。
